Существенным отличием эукариотической системы репликации является то, что каждая хромосома является полирепликоном: общий геном, например млекопитающих, содержит около 40 тыс. точек инициации? ориджинив. Ориджины трудно идентифицировать, поскольку общих элементов последовательности у них нет, они лишь характеризуются повышенным содержанием АТ-пар. Размер эукариотического репликон варьирует от 50 до 200 тыс. пар оснований, что совпадает с размерами петлевых доменов хроматина (см. раздел 4). Итак, хроматиновая петля? это один репликон, а ориджин совпадает с участком, ассоциированной с ядерным матриксом.

Инициация репликации зависит от мультибилкового комплекса ORC (Origin Recognition Complex), который практически постоянно присутствует на ориджини (рис. 9.19). При подготовке к репликации в фазе G1 клеточного цикла происходит фосфорилирование циклинозалежнимы киназами факторов регуляции клеточного цикла cdc6 и cdc45 (cdc? Cell division cycle). В результате эти факторы вместе с двумя моногексамерамы МСМ (которым отводится роль геликаз) взаимодействуют с ORC и индуцируют локальный плавления двойной спирали. МСМ вместе с cdc45 остаются и дальше в основах двух репликативных вилок. С расплетенными полинуклеотидной цепи взаимодействует RPA, cdc45 рекрутирует в каждую репликативную вилку ДНК-полимеразу ?. Последняя начинает синтез праймера, с основой вилки связывается RF-C, который загружает обруч PCNA, полимераза ? заменяется полимеразу ? / ? (так называемое переключение полимераз). В дальнейшем МСМ продолжает разделение цепей ДНК, а полимераза ? осуществляет синтез праймеров на цепи, что опаздывает, и каждый раз заменяется на другую копию полимеразы ? / ?. Репликация инициируется синхронно на соседних 25100 репликон, которые составляют так называемую репликативную фабрику. При этом различные участки хроматина реплицируются не одновременно: в последнюю очередь происходит репликация гетерохроматинового зон.


Загрузка...
Яндекс.Метрика Google+